什么样的诊断试剂盒靠谱？何启盖现场指出关键三点
随着病毒种类增多以及疫病的复杂化，仅凭兽医的经验感觉难以精准地诊断疫病，因此需要借助更为科学完整的猪病诊断流程。在第27届广东畜牧兽医科技大会上，华中农业大学动物医学院教授何启盖就猪病诊断技术进行了讲解。
何启盖：从敏感、特异和稳定性来评价诊断试剂盒
《农财宝典》新牧网记者 陈有柏
在疫病愈加复杂的时期，无论是对于疾病的防控还是治疗，诊断都是一个不可缺少的流程。在第27届广东畜牧兽医科技大会上，华中农业大学动物医学院教授何启盖分享《猪病诊断技术的应用及正确解读》主题报告。
华中农业大学动物医学院教授何启盖
何启盖指出，完整的猪病诊断流程首先是临床观察与流行病学调查，提出假设的病因；然后，通过实验室检测抗体和病原，进一步验证假设；最后是确诊，可以进行：病例复制（科赫法则）; 结合临床症状和病理学分析；治疗性诊断（一定要结合药敏试验）。
第27届广东畜牧兽医科技大会现场
可通过病理、血清和病原学诊断检测
对于常用的诊断技术，何启盖介绍，一是现场流行病学调查与诊断技术，包括：1、病例对照研究；2、队列研究；3、类症鉴别诊断：根据疾病之间不同的流行病学特征（发病季节发病日龄）、临床症状、病理变化的差异，采用排除法；4、设计调查表。
二是实验室诊断技术，分为病理学、血清学和病原学诊断检测技术。病理学诊断技术有病理切片 HE 染色：通过常规切片和冰冻切片等两种方式制备切片；以及分析病变特征（水泡变性、充血出血、梗死等）。前者用于病变观察，后者用于荧光抗体染色等快速诊断。以及免疫组化技术：病原（抗原）在组织中的分布。优质抗体和去除内源性酶的干扰是关键。
病原学检测可进行病原分离鉴定，包括：1、细菌分离（厌氧、需氧菌、难培养的细菌；抗生素或营养缺陷型选择性培养基）；2、病毒分离鉴定：有病变和无病变的病毒；不同毒株适应不同细胞； 3、其他分离 *** ：鸡胚尿囊腔（或卵黄囊、绒毛尿囊膜）接种分离；4、实验动物接种：家兔、小鼠等。
参会嘉宾听课很认真
靶基因的保守性会影响PCR诊断敏感度
在使用试剂盒进行诊断时，何启盖指出，可以通过以下方面来评价，比如敏感性：从目标群体中检出感染动物（≠发病动物）；特异性：区分感染和非感染动物；稳定性：批间变异系数低于 10%。
有些因素会影响到诊断 *** 的的敏感度，比如抗体检测 ELISA是靶蛋白的保守性、纯度；抗原检测 ELISA是捕获抗体和检测抗体的亲和力；PCR是靶基因的保守性；以及上述 *** 的检测程序的优化。与稳定性有关的因素是抗原和试剂的稳定性。
了解诊断的要领后，还需正确应用与分析诊断结果，何启盖指出，诊断 *** 的组合有串联或并联（平行）试验，是指两种或两种以上的诊断 *** 的配合应用和诊断结果的采用方式。串联试验能提高诊断的特异性；平行试验能提高诊断的敏感性。具体选择哪种试验，可根据疾病的造成损失的严重程度而定。
诊断技术前景广阔，应用将更简便
疫病的繁杂也促进了诊断 *** 的升级动物临床试验诊断试剂生产厂家，对于发展趋势动物临床试验诊断试剂生产厂家，何启盖认为会更加快速、简便、可现场使用；可视化、定量化，与免疫评估相关；以及高通量。他介绍了建立 IFN-γ-ELISpot *** 来评价猪伪狂犬病疫苗免疫效果。通过PRV IFN-γ-ELISpot *** 与抗体检测、攻毒保护结合，评价伪狂犬疫苗免疫程序。结果证明，弱毒疫苗与灭活疫苗组合，能产生高水平的体液免疫和细胞免疫，提供最强的保护力。
何启盖现场还展示了一个案例来说明诊断技术的应用。
✎应用例证
某规模化猪场新的案例发病情况：140 日龄；20多头达到40.5C以上。对于诊断的流程，何启盖表示，先进行发病日龄调查，发现是生长育肥猪多发，而且急性死亡，口鼻流血，肺脏粘连。
然后再进行细菌鉴定，使用ApxIV-PCR + ApxI/II/III-PCR 的 *** ，确定强弱毒和血清。他指出，ApxIV-ELISA 鉴别诊断试剂盒能区分灭活疫苗免疫猪与自然感染猪；区分 ApxIV 基因缺失活疫苗、亚单位疫苗与野毒感染猪；是启动猪传染性胸膜肺炎的净化 *** （加拿大种猪是传染性胸膜肺炎阴性）。
经过一系列的诊断，何启盖给出的处置是发病群体饮水给药；未发病或受威胁群体进行血清特异性疫苗免疫；并消除可能的诱因，如温度与通风。
农财宝典精彩内容
☆环保压力层层传递！广东342名官员环保失职失责被问责，佛山梅州 *** 非法养殖场
☆征集提名！40年来江西市场哪些饲料、动保、经销商最受养猪人信赖？
☆兽药涨价停不下来！原料药行业大洗牌：70%企业或将离场、半数产品已涨价
☆这些政策今天正式生效！口蹄疫亚洲I型退出免疫、仔猪日粮锌含量更高 *** 下调至110 mg/kg.....
感谢欣赏健康饮食，更多健康饮食请持续关注我们。